Глава 4.2 - Биологические факторы.

Естественных условиях микроорганизмы находятся в сложных взаимоотношениях, которые сводятся к симбиозу, метабиозу и антагонизму.

Симбиоз - это сожительство организмов разных видов, приносящих им взаимную пользу. При этом вместе они развиваются лучше, чем в отдельности.

Метабиоз - это такой вид взаимоотношений, при которых один вид микроорганизма создает благоприятные условия для другого. Метабиоз характерен для почвенных бактерии, которые используют для своей жизнедеятельности аммиак - продукт метаболизма аммонифицирующих почвенных бактерий.

Антагонизм - это  вид взаимоотношений, при котором один микроорганизм угнетает развитие другого. Антагонистические отношения выработались у микроорганизмов в ходе эволюции в борьбе за существование. Везде, где они обитают, между ними идёт борьба за источник питания, за кислород и так далее. Например, патогенные микроорганизмы, попав в окружающую среду ( почву, воду ), не выдерживают конкуренции с многочисленными сапрофитами и быстро погибают. Известна антагонистическая активность представителей нормальной микрофлоры кишечника человека - лактобацилл, бифидобактерий, кишечной палочки, которые являются антагонистами многих гнилостных бактерий. За счёт чего же происходит подавление одного микроорганизма другим ? Дело в том, что бактерии выделяют специфические вещества  - антибиотики, подавляющие развитие других микроорганизмов.В медицинской практике антибиотики используются для лечения многих инфекционных заболеваний. Антагонизм может развиваться в форме  конкуренции за источники питания. Если один микроорганизм использует другой организм как источник питания, то такой вид антагонизма называется паразитизмом.Примером паразитизма является отношение вирус - хозяин, бактериофаг - бактерии.

                        Глава 4.3

Уничтожение микроорганизмов в окружающей среде.

Для уничтожения микроорганизмов в окружающей среде применяются стерилизация и дезинфекция.

Стерилизация - это полное освобождение объектов окружающей среды от микроорганизмов и их спор. Существуют физические, химические и механические способы стерилизации.К наиболее распространенным способам физической стерилизации относятся автоклавирование и сухожаровая стерилизация.

Автоклавирование - это обработка паром под давлением, которая проводится в специальных приборах -  автоклавах. Автоклав представляет собой металлический цилиндр с прочными стенками, состоящий из двух   камер : парообразующей и стерилизующей. В автоклаве создаётся повышенное давление, что приводит к увеличению температуры и кипячения воды. Паром под давлением стерилизуют питательные среды, патологический материал, инструментарий, белье и так далее. Наиболее распространённый режим работы автоклава - 2 АТМ, 120 ° С, 15 - 20 минут. Началом стерилизации считают момент закипания воды.К  работе с автоклавом допускаются подготовленные специалисты, которые точно и строго выполняют все правила работы с этим прибором.

Сухожаровая стерилизация - проводится в печах Пастера. Это шкаф двойными стенками, изготовленный из металла и асбеста, нагревающийся с помощью электричества снабженный термометром. Сухим жаром стерилизуют, в основном, лабораторную посуду. Обеззараживание материала в нём происходит при 160 ° С в течении одного часа.

В бактериологических лабораториях используется такой вид стерилизации, как прокаливание над огнём. Этот способ применяют для обеззараживания бактериологических петель, шпателей, пипеток. Для прокаливания над огнём используют спиртовки или газовые горелки.К физическим способам стерилизации относятся также УФ - лучи и рентгеновское излучение. Такую стерилизацию проводят в тех случаях, когда стерелизуемые предметы не выдерживают высокой температуры.

Механическая стерилизация - проводится при помощи фильтров ( керамических, стеклянных, асбестовых ) и особенно мембранных ультрафильтров из коллоидных растворов  нитроцеллюлозы. Такая стерилизация позволяет освобождать жидкости ( биопрепараты, сыворотку крови, лекарства ) от бактерий, грибов, простейших и вирусов, в зависимости от размеров пор фильтра. Для ускорения фильтрации создают повышенное давление в ёмкости с фильтруемой жидкостью или пониженное давление в ёмкости с фильтратом.В микробиологической практике часто используют асбестовые фильтры Зейтца Шамберлана. Такие фильтры рассчитаны на одноразовое применение.

Химическая стерилизация - этот вид стерилизации применяется ограниченно. Чаще всего используют химические вещества для предупреждения бактериального загрязнения питательных сред иммунобиологических препаратов.

При химической стерилизации возможно использование двух токсичных газов : окись этилена и формальдегида. Эти вещества в присутствии воды могут инактивировать ферменты, ДНК и РНК, что приводит бактериальные клетки к гибели. Стерилизация газами осуществляется в присутствии пара при 50  - 80 ° С в специальных камерах. Этот вид стерилизацит опасен для окружающих, однако существуют объекты, которые могут быть повреждены при нагревании и поэтому их можно стерилизовать только газом. Например, оптические приборы, некоторые питательные среды. Для проведения стерилизации тех или иных объектов необходимо строго соблюдать установленный режим стерилизации  ( например, для питательных сред он указан в  рецепте  приготовления ). При проведении стерилизации в автоклаве необходимо осуществлять контроль стерилизации.

Существует три вида  контроля :

* Химический -  в автоклав при каждой загрузке кладут бензойную кислоту, мочевину, запаянные в ампулы, или индикаторы стерилизации ТВИ - 120 ° С - 1 АТМ, ТВИ - 132 ° С - 2 АТМ.

При достижении заданного режима стерилизации указанные вещества меняют свой цвет, а термовременные индикаторы темнеют ;

* Термический - 2 раза в месяц максимальным термометром во время стерилизации проводят замер температуры в контрольных точках, которая должна достичь заданных параметров ;

* Биологический -  проводится 2 раза в год. В контрольных точках помещают пробирки со споровой культурой Bacillus stearothermophilies, погибающей при 120 ° С в течение 15 минут. После стерилизации пробирки помещают в термостат при t = 55 ° С на 48 часов.При достижении заданного режима рост тесткультуры отсутствует: фиолетовый цвет среды в пробирках не меняется.Для сохранения стерильности стерилизуемые предметы должны иметь упаковку, не допускающую микробного загрязнения.